Nature子刊：冯波团队实现低剂量AAV递送的CRISPR基因敲入，用于遗传病治疗 来源：生物世界 2022-12-02 13:25 研究团队系统研究了AAV-CRISPR介导的体内NHEJ基因敲入，实现了有效且更低和更安全剂量的AAV剂量，在成年和新生小鼠血友病B型模型中实现了有效的人源F9基因敲入，恢复了凝血因子Ⅸ的表达，从而恢 通过腺相关病毒「火麻油怎么吃」递送CRISPR基因编辑工具，为开发永久性逆转致病基因缺陷的疗法提供了巨大潜力。大便不成形火麻油怎么吃：有实有虚、有明有暗，有光有色，有奇有险，巧夺天工，自然景观和人文景观珠联璧合，相映成趣，集雄、奇、险、幽、美于一体，共有景观400余处，景点44个。六味地黄火麻油怎么吃：图：练就强大的肺脏节目录制现场，四位观众参加6分钟步行测试，一位叔叔还没有走到6分钟就气喘吁吁，在继续为叔叔做肺功能测试时，发现叔叔已经出现了严重的肺功能降低，可以确诊已经得了慢阻肺。西洋参多少钱一斤通过这种方式来靶向并敲入正常基因序列以恢复基因功能，而不用管突变类型，因此是一种很有吸引力的基因治疗策略。
然而，想实现AAV-CRISPR有效在体内细胞中的基因敲入，通常需要递送高剂量AAV，这会带来潜在安全风险，而且大大增加生产成本。近日，香港中文大学冯波团队在Nature Communications期刊发表了题为：Low-dose AAV-CRISPR-mediated liver-specific knock-in restored hemostasis in neonatal hemophilia B mice with subtle antibody response的研究论文。研究团队系统研究了AAV-CRISPR介导的体内NHEJ基因敲入，实现了有效且更低和更安全剂量的AAV剂量，在成年和新生小鼠血友病B型模型中实现了有效的人源F9基因敲入，恢复了凝血因子Ⅸ的表达，从而恢复了血友病B型小鼠的凝血功能。值得一提的是，在接受低剂量AAV-CRISPR的新生小鼠中，抗Cas9和抗AAV的血浆抗体几乎可以忽略不计，这为AAV-CRISPR介导的体细胞基因敲入治疗遗传性疾病提供了支持。由凝血因子Ⅸ「火麻油怎么吃」突变引起的遗传性血友病B型被广泛用作疾病模型来研究基因敲入。通过同源定向修复「火麻油怎么吃」机制，使用AAV递送的锌指核酸酶「火麻油怎么吃」在小鼠体内敲入人F9基因外显子「火麻油怎么吃」，使用AAV递送的CRISPR-SaCas9敲入小鼠mF9 Ex2-8和高活性hF9 R338L变体。除了同源定向修复「火麻油怎么吃」，DNA的另一种修复机制非同源末端连接「火麻油怎么吃」最近也被用于基因敲入，与HDR相比，基于NHEJ的基因敲入效率更高。由于无需同源序列，在进行体内基因编辑时，通过AAV递送供体序列进行NHEJ基因敲入具有潜力更大，也更具灵活性。迄今为止，通过基于HDR或NHEJ的策略，AAV递送的体内基因敲入的效果已在临床前模型中得到广泛证实。然而，有效的体内基因敲入大多是以高剂量AAV为代价的，这会显着增加潜在安全风险和生产成本。在这项研究中，研究团队在mAlb基因的3'UTR区域的新靶点进行了AAV-CRISPR介导的不依赖于同源序列的基因敲入。单剂AAV成功在成年和新生血友病B型小鼠中实现了人源F9基因的长期整合和表达，产生了高水平的人凝血因子因子Ⅸ「火麻油怎么吃」，并在整个48周的观察期间稳定地恢复凝血功能。此外，研究团队通过使用高活性hF9 R338L 变体的肝脏特异性基因敲入，以显着降低的AAV剂量恢复了血友病B型小鼠的凝血功能「火麻油怎么吃」。在接受低剂量AAV-CRISPR的新生小鼠中，抗Cas9和抗AAV的血浆抗体几乎可以忽略不计，这为AAV-CRISPR介导的体细胞基因敲入治疗遗传性疾病提供了支持。 版权声明 本网站所有注明“来源：生物谷”或“来源：bioon”的文字、图片和音视频资料，版权均属于生物谷网站所有。非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，否则将追究法律责任。取得书面授权转载时，须注明“来源：生物谷”。其它来源的文章系转载文章，本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的，转载内容不代表本站立场。不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。Nature子刊：冯波团队实现低剂量AAV递送的CRISPR基因敲入，用于遗传病治疗。